纤维蛋白原的生物化学分析论文

纤维蛋白原的生物化学分析论文

　　摘要：纤维蛋白原 (Fibrinogen, Fib) 可能会引发心血管、恶性肿瘤、糖尿病等相关疾病, Fib经过遗传变异之后, 导致人体出血或者产生血栓性疾病。因此, 在临床领域对Fib的测定显得十分重视。本文对纤维蛋白原的生物化学进行分析, 并对其检测方式和评价加以阐述。

　　关键词：纤维蛋白原; 生物化学; 检测方法;

　　纤维蛋白原的英文缩写为Fib, 属于血浆中具有较高含量的凝血蛋白, 主要构成要素为巨核细胞和肝细胞。从传统的角度来看, Fib的主要作用是作为消耗性凝血病的诊断指标, 如若人体中的Fib数值较高, 则极易引发冠心病、血栓性疾病、自发流产等疾病, 因此, 我国对此加强了重视, 并对测定精度等方面的要求也进行了提升。

　　1 纤维蛋白原的生物化学分析。

　　1.1 分子结构。

　　Fib属于一种对称二聚体结构, 主要组成部分为α、β以及γ链。从电镜显示中可看出, Fib分子呈现出棒状的结构, 具有3个球状区域。中心地区位E区, 主要构成为6条多肽链的N末端, 左右两边区域被称为D区, 主要构成为Bβ以及γ链的C末端。其中, Aα链的C端不受D区域的管辖, 具有较强的自由性。E区和D区之间有3条多肽链, 它们共同构成了一个盘绕螺旋区域。

　　1.2 分子性能。

　　Fib在人体中属于高度异质性的蛋白, 此种特性主要是受到基因多态的影响, 并且由m RNA的翻译和剪接以后呈现出来。比如, Aα链中, 如若其末端受到丝氨酸、蛋白酶等元素的影响, 在很大程度上对γ链和Bβ中的糖链成分造成破坏, 则其异质性将被充分突显出来。在国外, 此方面的研究专家Nieuwenhuizen提出, 在人类中存在成千上万Fib分子, 并且Fib分子中所具备的异质性, 不但对生理和病理具有较大的影响, 同时在利用不同的测定方式对Fib进行检测时, 也将会获取不一样的结果[1]。

　　Aα链异质性的主要体现在于人类外周血中有将近55%的Aα链含量, 相当于611个氨基酸, 而其他的45%中也存在着少量氨基酸, 这里所形成的Aα链属于受到酶水解的代谢物质, 其中包括HMW、LMW两种, 并且在HMW中具备两条完整的Aα链, 而在LME中存在一条完整的Aα链。与LMW相比来看, HMW的凝固性较强, 因此使用功能法的方式对Fib进行测定的过程中, 分子中存在的异质性将会在一定程度上对最终结果产生影响。

　　Bβ链的异质性不甚明显, 该链条中含有461个氨基酸, 在测量中对结果的影响不太显着。在γ链中, 主要包含411个氨基酸, 专家Francis提出, 对于成人来说, 通常在体内的γ链分子含量为3种, 即50k D、55k D、57.5k D。其中, 最高γ链的产生主要是受到m RNA的影响, 人体内的γ链含量大约占7%。

　　2 纤维蛋白原的检测方式和评价。

　　现阶段, 由于对Fib的重视程度较高, 因此在测定方式上也变得更加多样, 其主要检测原理可以划分为3大类别, 即可凝固蛋白法、物理-化学法、免疫学法。近几年, 自动化血凝仪不断创新和优化, 得到了更加广泛的应用, 在测量方式上, 也从以往的凝血酶时间测定转变为PT-der测定法。

　　2.1 热/盐沉淀法。

　　我国目前应用最为广泛的Fib测定方式为热/盐沉淀法, 按照相关文献中的内容进行操作, 在部分文献中还推荐了亚硫酸钠盐析法等测量方式, 由于此种方式在特异性方面的显示不甚强烈, 在血浆中易与其他蛋白之间相互产生作用, 对最终测定结果的精准度产生不利影响, 因此最后得到的结果往往偏高。

　　2.2 von Class法。

　　在可凝固法中, 最为常用的一种便是von Class法, 此测定方式的原理:首先选择足够数量的凝血酶与稀释后的血浆相融合, 对其中产生纤维蛋白的时间进行记录, 蛋白产生的时间与蛋白原含量之间呈现反比例关系。此方式的使用十分简单方便、操作简易、实施效率高, 具有良好的特异性, 是当前十分受欧美等发达国家欢迎的Fib测定方式, 并且已经有相关厂家开始生产与该方式相配套的试剂盒。但由于Fib具有较强的异质性, 因此, 在对产物进行降解处理的过程中, 其中存在的肝素等物质将会在一定程度上对最终的测试结果产生干扰[2]。

　　2.3 可凝固蛋白法。

　　在可凝固蛋白法的实施过程中, 主要原理为将凝血酶与血浆相融合, 使Fib凝结成蛋白状固体, 对固体进行收集后冲洗干净, 利用适当的仪器称重, 或者利用尿素或强碱相融合以后, 对比和测定其色泽程度。利用此种方式能够对Fib中的凝血作用进行充分反映, 准确地判断其功能和性质。英国生物标准研究所对此方面进行研究后, 提出的Jacobsson改良方式, 与该方法有异曲同工之妙。但是, 由于英国提出的改良方式实施起来较为繁琐复杂, 与此种方式相比来看可行性较差, 因此只能用作参考。

　　3 结语。

　　Fib与心血管疾病、恶性肿瘤、糖尿病等疾病有着密切关系, Fib的检测方式多种多样, 应根据具体的实际情况进行检验, 以此来保障检测结果的准确性和真实性。

　　参考文献

　　[1]赵静.蚯蚓蛋白同功酶Ⅲ-1、Ⅱ结构与功能的研究[D].长春:吉林大学, 2014.

　　[2]王晓霞.H2N (CH2) 7-CO-Gly-Asp-Trp的设计、合成及抗血小板作用的研究[D].太原:山西医科大学, 2015.

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