- 相关推荐
注射用头孢西丁钠含量测定方法的改进
毕业论文是检验在校学习成果的重要文档，如何写好毕业论文也成为每个即将毕业的学子最关心的事情之一，可以参考一些优秀的论文范文
【摘要】 目的 采用离子对色谱法测定注射用头孢西丁钠的含量，为完善注射用头孢西丁钠质量标准提供依据。方法 采用离子对色谱法，色谱柱为Agilent ZORBAX 80A Extend C18柱(150 mm×4.6 mm，5μm );流动相为5 mmol·L-1氢氧化四丁基铵溶液?乙腈(体积比750∶250);检测波长254 nm;流速为1 mL·min-1。结果 头孢西丁的质量在0.310 1～3.101 0 μg范围内与峰面积线性关系良好，r=0.999 98;平均回收率为100.2%，RSD为1.05%。结论 本文方法简单、准确、重复性好，为完善注射用头孢西丁钠含量测定方法提供了依据。
【关键词】 头孢西丁钠;离子对色谱法;含量测定
头孢西丁为β?内酰胺类抗生素，由美国默沙东公司开发并于1974年上市。头孢西丁抗菌作用和抗菌谱同第二代头孢菌素，但对厌氧菌特别是脆弱拟杆菌的作用更强，对β?内酰胺酶稳定。临床上用于腹膜炎和其他腹腔内、盆腔内、妇科感染、败血症、心内膜炎、尿路感染(包括淋病)、呼吸道感染、骨关节软组织感染。采用注射用头孢西丁钠的国家标准[1,2]及相关文献[3,4]方法测定头孢西丁的含量，结果头孢西丁的理论塔板数较低，色谱峰拖尾较严重。本文采用离子对色谱(IPC)法测定头孢西丁的含量，能较大程度地提高头孢西丁的理论塔板数，改善色谱峰拖尾现象，且操作简便易行，结果重现性好，专属性强。
1 仪器与试药
岛津LC2010A/C型高效液相色谱仪，Class?VP色谱工作站,METTLER TOLEDO十万分之一电子天平。
乙腈为色谱纯，实验用水为超纯水，磷酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、10%四丁基氢氧化铵溶液为分析纯。头孢西丁对照品(批号130572?200701，质量分数为95.3%,供含量测定用，中国药品生物制品检定所)，注射用头孢西丁钠(康田制药(中山)有限公司，批号0711011、0711012、0711013)。
2 测定方法的建立
2.1 色谱条件
色谱柱：Agilent ZORBAX 80A Extend?C18柱(150 mm×4.6 mm，5 μm);流动相：5 mmol·L-1氢氧化四丁基铵溶液(取10%四丁基氢氧化铵溶液13.2 mL，加水900 mL后，用1 mol·L-1磷酸溶液调节pH值至4.0，再用水稀释至1 000 mL)?乙腈(体积比750∶250);检测波长254 nm;流速为1 mL·min-1;进样量5 μL。在此条件下供试品和对照品的高效液相色谱图见图1、图2。
2.2 供试品溶液的制备[1,2]
取本品内容物，精密称取适量(约相当于头孢西丁15 mg)置50 mL量瓶中，用磷酸盐缓冲液(称取磷酸二氢钾1.0 g和磷酸氢二钠1.8 g，加水900 mL使溶解，用磷酸或10 mol·L-1氢氧化钠溶液调节pH至7.0，再用水稀释至1 000 mL，摇匀)溶解并稀释至刻度，制成每1 mL中约含头孢西丁0.3 mg的溶液，作为供试品溶液。
2.3 对照品储备液的制备
取头孢西丁对照品适量，精密称定，加磷酸盐缓冲液制成0.6 mg·mL-1的对照品储备液。
2.4 线性关系
分别精密量取质量浓度为0.620 2 mg·mL-1头孢西丁对照品储备液1、2、5、6、8 mL，加磷酸盐缓冲液稀释成质量浓度为0.062 02～0.620 2 mg·mL-1的对照品溶液，按“2.1”项下的色谱条件进行测定。以质量(m)为横坐标，各自峰面积(A)为纵坐标绘制标准曲线,得回归方程为
A=1.277×106m+9.774×103，r=0.999 9(n=6)
结果表明头孢西丁的质量在0.310 1～3.101 0 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.5 精密度试验
取质量浓度为0.3 mg·mL-1的对照品溶液，按“2.1”项下的色谱条件进行测定，重复进样5次，测得头孢西丁峰面积的RSD为0.57%，表明试验精密度良好。
2.6 稳定性试验
取同一批号供试品溶液于0、1、2、3、4、5、6 h内按“2.1”项下的色谱条件进行测定，测得头孢西丁峰面积的RSD为0.98%，表明供试品溶液在6 h内基本稳定。
2.7 重复性试验
取同一批号样品，分别按“2.2”项下的方法平行制备6份供试品溶液，按“2.1”项下的色谱条件进行测定，头孢西丁的平均含量为94.26%，RSD为0.29%，表明方法重复性良好。
2.8 回收率试验
精密称取已知含量的样品5份，按“2.2”项下的方法制成每1 mL中约含头孢西丁1 mg的供试品溶液，分别精密吸取3 mL供试品溶液置5个20 mL的容量瓶中，再分别精密加入已知浓度的对照品溶液10 mL，加磷酸盐缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀，按“2.1”项下的色谱条件进行测定，结果头孢西丁的平均回收率为100.4%，RSD为1.05%。见表1。表1 头孢西丁加样回收率试验
2.9 样品测定
取3批样品，按“2.2”项下的方法制备供试品溶液，按“2.1”项下的色谱条件进行测定，以外标法计算头孢西丁的含量。结果3批样品中头孢西丁的平均百分含量分别为94.43%,94.71%，93.59%。
3 讨 论
3.1 检测波长的选择
参照注射用头孢西丁钠的国家标准[1，2]，选择254 nm为检测波长。
3.2 流动相中氢氧化四丁基铵浓度的选择[5]
以水?乙腈(体积比750∶250)为流动相，分别考察流动相中氢氧化四丁基铵浓度依次为0 、2.5、5、10及20 mmol·L-1时对头孢西丁色谱行为的影响。结果表明，当流动相中氢氧化四丁基铵浓度为5 mmol·L-1时，头孢西丁的理论塔板数和拖尾因子最理想，故氢氧化四丁基铵浓度采用5 mmol·L-1。
3.3 流动相的pH值选择
以5 mmol·L-1氢氧化四丁基铵溶液?乙腈(体积比750∶250)为流动相，改变其pH值，考察pH值对头孢西丁的色谱行为的影响。结果表明，在pH 4.0时头孢西丁峰的理论塔板数最大及拖尾因子最小，故流动相的pH值选择4.0。
3.4 方法耐用性考察
分别对不同厂牌型号的色谱柱进行考察，并与国家药品标准的色谱条件进行比较,结果见表2。由表2可见，采用国家药品标准[1，2]的流动相试验达不到国家标准[1]所规定的要求(理论塔板数按头孢西丁峰计算应不低于2 800，拖尾因子应不大于1.5);只有使用新的色谱柱才能达到要求;用改进后的方法测定，使用不同的色谱柱和不同的高效液相色谱仪均能达到国家标准的规定，表明本文方法耐用性、重现性良好。表2 方法耐用性考察注：编号1-6采用岛津LC2010A/C型高效液相色谱仪;编号7-8采用Agilent LC1100高效液相色谱仪
【参考文献】
[1] 国家食品药品监督管理局.YBH14042005国家药品标准[S].
[2] 国家食品药品监督管理局.YBH17442006国家药品标准[S].
[3] 王秀萍，费瀚雨，储潼.HPLC法测定注射用头孢西丁钠的含量[J].中国药师，2007(01):46-47.
【注射用头孢西丁钠含量测定方法的改进】相关文章：
烟酰胺的含量测定方法10-08
氯苯那敏含量测定方法学10-08
羟苯磺酸钙胶囊不同含量测定方法的比较10-06
注射用头孢呋辛钠质量10-05
氯气与钠反应实验的改进10-08
注射用头孢米诺钠合理用药临床10-05
铁矿石磁性铁含量的测定分析论文10-09
试验条件对纺织品甲醛含量测定的影响探讨10-06
三花龙胆中不同部位龙胆苦苷的含量测定10-08