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干化学法与免疫胶体金法在尿液潜血检测中的应用
干化学法与免疫胶体金法在尿液潜血检测中的应用【1】
摘要：目的 比较尿液潜血检测中干化学法与免疫胶体金法的结果。
方法 对我院2012年6月～2014年6月收治的146例泌尿肾病科患者尿液样本分别进行干化学法和免疫胶体金法检验，比较检验结果。
结果 干化学法假阴性为0.0%，假阳性为8.90%，免疫胶体金法假阳性为0.0%，假阴性为0.68%，结果具有显著差异(P<0.05)。
结论 尿潜血试验中免疫胶体金法在灵敏度上要比干化学法弱，但特异度方面要较干化学法强，因此临床中可将两种方法有机结合起来，以提高检测结果的灵敏度和特异度。
关键词：干化学法;免疫胶体金法;尿液潜血
尿液潜血试验是尿常规检查中的一项，是尿路感染及肾脏疾病诊断中的一个重要指标，目前临床中用于尿液潜血试验的方法有干化学法和免疫胶体金法[1]。
为进一步探讨两种方法在尿液潜血检测中的应用，特选取我院患者作为研究对象。
1 资料与方法
1.1一般资料 将我院2012年6月～2014年6月收治的146例泌尿肾病科患者作为此次研究的主要对象，其中女69例，男77例，年龄18～60岁，平均年龄(36.8±3.2)岁。
1.2方法 在早晨进行患者首次中段尿的取样，需要注意的是，必须在2h内进行三种比较重要的检验，即胶体金单克隆抗体隐血试验、红细胞镜检以及干化学检测。
通过严密的操作和实验，得出精确的实验结果，并进行一定的记录工作，确保各种数据的有效性和适用性。
1.3尿液潜血检验结果的判断标准 阳性：镜检(+)，免疫胶体金法(+)，干化学法阴血(+);阴性：镜检(-)，免疫胶体金法(-)，干化学法阴血(-);假阳性：镜检(-)，免疫胶体金法(-)，干化学法阴血(+);假阴性：镜检(+)，免疫胶体金法(+)，干化学法阴血(-)。
1.4统计学分析 通过利用SPSS20.O软件将此次研究的数据进行统计和分析，其中计数的资料的比较要行χ2检验，以P<0.05为差异具有一定的统计学意义。
2 结果
干化学法假阴性为0.0%，假阳性为8.90%，免疫胶体金法假阳性为0.0%，假阴性为0.68%，结果具有显著差异(P<0.05)，见表1。
3 讨论
在进行尿液潜血检测的过程中，必须要进行严格的观察和实验，确保检测的结果具有较高的灵敏度和特异度，从而为临床治疗提供宝贵的参考资料，提升医疗检测的质量和水平，例如在对患者进行临床检验的过程中，如果患者的镜检红细胞呈阴性，但尿液潜血检测结果是呈阳性，就应该考虑是不是患者的泌尿道划伤或者在血管的内外存在着溶血的现象，一般要对患者进行复诊，但是复诊会增加病患的医疗负担，并且很容易引发医患纠纷。
因此必须使用先进的检测技术进行高效检测，而干化学法和免疫胶体金法在尿液潜血检测中的应用使得检测的结果有了很大的保障[2、3]。
干化学法是将液体检测样品加到特定的干燥试剂条上，通过被测样品的水分来实现特定的化学反应，再进行以酶为基础的干化学分析，其原理是根据红细胞中血红蛋白所含的血红素具有类似过氧化物酶的作用，通过血红素催化分解过氧化氢，释放出新生态氧，使邻联甲苯胺氧化呈色，从而达到检测隐血的目的，利用这种自动化的仪器可以对尿液中的一些成分进行检测，并且使用的标本少，操作简单快捷，适合进行疾病筛查和临床疾病的普查
但由于尿液中的成份很复杂，常存在一些类似过氧化物酶活性的物质，如肌红蛋白、某些细菌繁殖代谢产物等因素可造成干化学隐血结果的假阳性，而还原型谷胱苷肽、维生素C等还原剂存在时，可竞争性抑制反应，导致干化学法隐血检测结果出现假阴性。
干化学法隐血阳性可通过镜检红细胞的存在来证实，但镜检未发现红细胞的现象在临床检验中也很常见，这既可能是红细胞溶解导致仅有游离血红蛋白存在，也可能是干化学法检测隐血出现了假阳性;干化学法隐血阴性可能是真阴性，但也不能排除由于检测敏感性不足或维生素C、还原型谷胱苷肽等还原剂存在而导致的假阴性。
因此，临床检验中必须要控制好尿液放置的时间、阳光的照射以及药物性等，按照规定的要求进行操作，避免不利因素对检测结果的影响。
使用该仪器可以把催化之后的氧化氢当做电子受体，从而实现色源的氧化呈色，以达到便于分析检测结果的目的[4、5]。
免疫胶体金法其实是一种新的免疫标记技术法，能够有效地利用胶体金来作为示踪标记物，观察应用之后的特异性原抗体反应。
该技术的标记物制作简单，不需要使用一些放射性的同位素，也不需要荧光显微镜，使用的方法具有一定的敏感性和特异性，而且应用广泛，不仅适用于液相免疫测定，而且更适用于固相免疫分析、流式细胞术等领域。
但是免疫胶体金技术也存在着不足，在检测的过程中会经常出现漏洞，它检测的灵敏度以及可重复性也有待提升，并且胶体金颗粒本身也具有一定的局限性，因此以其为依托的免疫胶体金技术也是存在局限的，例如清洁度要求高、胶体金溶液稳定差、胶体金颗粒大、渗透能力大等都会影响到检测的结果。
在患者的尿液中存在着有机红蛋白，并且尿液中的杂质具有过氧化酶相似的活性，尿液样本中的13例在镜显中没有发现红细胞，但是免疫胶体金技术检测的结果为阴性，通过两种技术的对比分析发现，13例样本呈假阳性。
由此可见，干化学法在进行尿液潜血检测时具有较高的灵敏度，可以被运用到临床筛查中，但是它也存在着缺点，其特异性并不高，很容易在进行结果检测时出现一定的误差，对患者的病情造成误诊，增加诊断费用，引发医患纠纷。
同时，在本次实验当中，110例尿液样本经过免疫胶体金法进行检测全部呈阳性，它的检测效率比干化学法检测的效率要高，并且两者之间的差异存在着统计学意义，但是有2例样本在高倍显微镜下呈阳性，而免疫胶体金法检测的结果却是阴性，出现这种状况是因为样本尿液的红细胞含量低，超出了其检测的范围，使得检测的结果出现了误差。
通过此次试验结果的分析可以明确的指示，免疫胶体金法在灵敏度上要比干化学法弱，而在特异度方面要比干化学法强，因此在进行对病患的尿液潜血检测的过程中，要将两种方法有机结合起来，确保检测结果具有较高的灵敏度和特异度，提升检测工作的质量和水平。
参考文献：
[1]杨宗树，张蕾.两种方法检验尿潜血阳性的准确度比较[J].吉林医学，2012，33(29)：6301.
[2]郭宝丽.干化学法尿潜血异常结果分析[J].医学检验与临床，2011，22(4)：100.
[3]王树林.单纯干化学法检测尿液潜血假阳性鉴别与分析[J].内蒙古医学杂志，2013，45(4)：483-484.
[4]聂宗杰.不同检验方法对尿潜血阳性的准确度分析[J].现代诊断与治疗，2013，4(8)：1847-1848.
[5]张翠玲，王贞，白洪涛，等.一种鉴别尿潜血假阳性的方法[J].大连医科大学学报，2011，33(1)：94-95.
干化学法与免疫胶体金法在尿液潜血检测中的应用【2】
[摘要] 目的 探讨干化学法和免疫胶体金法在尿液潜血检测中的差异，为尿液潜血临床治疗提供可靠的参考资料。
方法 将该院在2012年7月―2013年7月所治疗的252例肾病患者作为此次研究的主要对象，分别给予免疫胶体金法、干化学法检验，两种检验组分别为实验组和对照组。
利用人工显微镜技术对其质量进行监控，采用统计学对患者的检测结果进行对比分析，研究其灵敏度和特异度的差异。
结果 用免疫胶体金法测得的结果表明，有0例假阳性患者，有3例假阴性患者，并且其概率是1.20%;用干化学法测得的结果显示，有0例假阴性患者，有56例假阳性患者，并且其概率为22.22%。
结论 干化学法检测的灵敏度比免疫胶体金检测的灵敏度强，而免疫胶体金检测的特异度比干化学法检测的特异度要强，值得临床推广应用。
[关键词] 干化学法;免疫胶体金法;尿液;临床效果
在进行尿液潜血的实验中，一般采用的是干化学法，而干化学法检测尿液潜血存在着一定的不足，例如在假阳性和假阴性的检测上还有一定的缺陷[1]，而免疫胶体金法的应用可以对其进行有效的弥补，通过两者之间的对比来进行差异分析，从而不断地提升尿液潜血检测工作的灵敏度和特异度。
为探讨干化学法和免疫胶体金法在尿液潜血检测中的差异，为尿液潜血临床治疗提供可靠的参考资料，该研究选择该院在2012年7月―2013年7月所治疗的252例肾病患者作为对象进行研究，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取该院治疗的252例肾病患者作为此次研究的主要对象，随机分成两组，实验组为免疫胶体金法组，对照组为干化学法组，在病患当中有138例为女性，114例为男性，年龄1～23岁，平均年龄(9.12±0.36)岁。
1.2 检测方法
要在早晨进行患者首次中断尿的取样，需要注意的是，必须在两个小时内进行三种比较重要的检验，即胶体金单克隆抗体隐血试验、红细胞镜检以及干化学检测。
通过严密的操作和实验，得出精确的实验结果，并进行一定的记录工作，确保各种数据的有效性和适用性，为之后的尿液潜血分析提供宝贵的参考资料。
1.3 尿液潜血检验结果的判断标准
阳性：镜检(�)，免疫胶体金法(�)，干化学法阴血(�);阴性：镜检(�)，免疫胶体金法(�)，干化学法阴血(�);假阳性：镜检(�)，免疫胶体金法(�)，干化学法阴血(�);假阴性：镜检(�)，免疫胶体金法(�)，干化学法阴血(�)。
1.4 统计方法
对实验的结果进行统计分析。
通过利用SPSS14.0软件将此次研究的数据进行仔细的统计和分析，其中计数资料用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
对照组假阴性为0.0%，假阳性为22.22%，观察组假阳性为0.0%，假阴性为1.20%，差异有统计学意义(P<0.05)，具体的检测数据如表1所示。
表1 两组患者的尿潜血检验结果比较[n(%)]
3 讨论
3.1 干化学法的含义以及临床应用
干化学法分析技术是将液体检测样品加到特定的干燥试剂条上，通过被测样品的水分来实现特定的化学反应，再进行以酶为基础的干化学分析，这就是所谓的干化学法分析技术。
其原理是根据红细胞中血红蛋白所含的血红素具有类似过氧化物酶的作用，通过血红素催化分解过氧化氢，释放出新生态氧，使邻联甲苯胺氧化呈色，从而达到检测隐血的目的[2]。
干化学法分析技术不仅仅被广泛的应用于定性检查，而且还可以进行半定量和定量的深入分析，为临床检测提供了更大的便利。
且干化学法分析技术通常是运用反射光度法或者是差示电极法来进行测量的，具有准确度高和测量速度快的特点，操作简单易行，不需要进行任何试剂储备或是试剂配制，而且其中的多层膜会对干扰性的物质进行过滤，产生化学反应的水分来源于标本液体成分，可以有效地提升检测的灵敏度[3]。
但由于尿液中的成份很复杂，常存在一些类似过氧化物酶活性的物质，如肌红蛋白、某些细菌繁殖代谢产物等因素可造成干化学隐血结果的假阳性，而还原型谷胱苷肽、维生素C等还原剂存在时，可竞争性抑制反应，导致干化学法隐血检测结果出现假阴性。
干化学法隐血阳性可通过镜检红细胞的存在来证实，但镜检未发现红细胞的现象在临床检验中也很常见，这既可能是红细胞溶解导致仅有游离血红蛋白存在(低渗尿液中红细胞溶解更为明显)，也可能是干化学法检测隐血出现了假阳性;干化学法隐血阴性可能是真阴性，但也不能排除由于检测敏感性不足或维生素C、还原型谷胱苷肽等还原剂存在而导致的假阴性。
且干化学法分析技术中在使用差示电极法原理时，其中的多膜片只能使用一次。
在该研究中，对照组假阴性为0.0%，假阳性为22.22%，表明存在一定的假阳性及假阴性问题。
3.2 免疫胶体金法的含义以及临床应用
免疫胶体金法其实是一种新的免疫标记技术法，主要是利用免疫学方法来对尿液潜血给予检测，能够有效地利用胶体金来作为示踪标记物，观察应用之后的特异性原抗体反应。
胶体金标记技术就是蛋白质分子吸附在胶体金颗粒表面的过程，因为红色的胶体金颗粒遇到相应的抗原或是抗体就会聚集起来，达到一定密度就会呈现出肉眼可见的红色，所以在尿液潜血的检测中被推广利用[4]。
免疫胶体金技术在临床应用中具有可操作性，胶体金颗粒对于蛋白质分子的吸附主要是依据PH值，如果胶体金的PH值比蛋白质分子的等电点低，就会在聚集的同时不具备结合的能力，此外胶体金颗粒的离子强度、蛋白质分子量等也会影响到两者的结合[5]。
但是这种技术的标记物制作简单，不需要使用一些放射性的同位素，也不需要荧光显微镜，使用的方法具有一定的敏感性和特异性，而且应用广泛，不仅适用于液相免疫测定，而且更适用于固相免疫分析、流式细胞术等领域[2]。
在该研究中，观察组假阳性为0.0%，假阴性为1.20%，表明该方法检测尿液潜血不会具有假阳性问题，可有效解决干化学法所导致的假炎性问题。
但是免疫胶体金技术也存在着不足，在检测的过程中会经常出现漏洞，它检测的灵敏度以及可重复性也有待提升，并且胶体金颗粒本身也具有一定的局限性，因此，以其为依托的免疫胶体金技术也是存在局限的，例如清洁度要求高、胶体金溶液稳定差、胶体金颗粒大、渗透能力大等都会影响到检测的结果。
3.3 干化学法和免疫胶体金法在尿液潜血检测中的比较应用
在进行尿液潜血检测的过程中，必须要进行严格的观察和实验，确保检测的结果具有较高的灵敏度和特异度，从而为临床治疗提供宝贵的参考资料，提升医疗检测的质量和水平，例如在对患者进行临床检验的过程中，如果患者的镜检红细胞呈阴性，但尿液潜血检测结果是呈阳性，就应该考虑是不是患者的泌尿道划伤或者在血管的内外存在着溶血的现象，一般要对患者进行复诊，但是复诊会增加病患的医疗负担，并且很容易引发医患纠纷[6]，因此，必须使用先进的检测技术进行高效检测，而干化学法和免疫胶体金法在尿液潜血检测中的应用使得检测的结果有了很大的保障。
对于检测的结果分析主要是通过干化学法尿液分析仪，利用这种自动化的仪器可以对尿液中的一些成分进行检测，并且使用的标本少，操作简单快捷，适合进行疾病筛查和临床疾病的普查，但是必须要控制好尿液放置的时间、阳光的照射以及药物性等，按照规定的要求进行操作，避免不利因素对检测结果的影响。
使用该仪器可以把催化之后的氧化氢当作电子受体，从而实现色源的氧化呈色，以达到便于分析检测结果的目的[7]。
在患者的尿液中存在着有机红蛋白，并且尿液中的杂质具有过氧化酶相似的活性，尿液样本中的56例在镜显中没有发现红细胞，但是免疫胶体金技术检测的结果为阴性，通过两种技术的对比分析发现，56例样本呈假阳性[8]。
由此可见，干化学法在进行尿液潜血检测时具有较高的灵敏度，可以被运用到临床筛查中，但是它也存在着缺点，其特异性并不高，很容易在进行结果检测时出现一定的误差，对患者的病情造成误诊，增加诊断费用，引发医患纠纷。
同时，在该实验当中，有156例尿液样本经过免疫胶体金法进行检测全部呈阳性，它的检测效率比干化学法检测的效率要高，优化率为73.83%，并且两者之间的差异有统计学意义，即P<0.05。
但是有3例样本在高倍显微镜下呈阳性，而免疫胶体金法检测的结果却是阴性，出现这种状况是因为样本尿液的红细胞含量低，超出了其检测的范围，使得检测的结果出现了误差。
通过此次试验结果的分析可以明确的指示，免疫胶体金法在灵敏度上要比干化学法弱，而在特异度方面要比干化学法强，因此，在进行对病患的尿液潜血检测的过程中，要将两种方法有机结合起来，确保检测结果具有较高的灵敏度和特异度，提升检测工作的质量和水平。
[参考文献]
[1] 田利荣，孙恒寿，张庆贤，等.尿液干化学法和镜检法检测尿液红细胞结果与性别因素的分析[J].中国社区医师：医学专业，2012，14(20)：261-262.
[2] 徐新，罗春丽，蒲军，等.干化学法尿隐血检测的可靠性分析[J].重庆医学，2012，41(18)：1802-1804.
[3] 杨宗树，张蕾.两种方法检验尿潜血阳性的准确度比较[J].吉林医学，2012，33(29)：6301.
[4] 郭宝丽.干化学法尿潜血异常结果分析[J].医学检验与临床，2011，22(4)：100.
[5] 张翠玲，王贞，白洪涛，等.一种鉴别尿潜血假阳性的方法[J].大连医科大学学报，2011，33(1)：94-95.
[6] 王树林.单纯干化学法检测尿液潜血假阳性鉴别与分析[J].内蒙古医学杂志，2013，45(4)：483-484.
[7] 孔京慧，宋银森.干化学法、免疫胶体金法在儿童尿液潜血检测方面特异性的差异[J].中国保健营养，2013，23(2下旬刊)：993-993.
[8] 聂宗杰.不同检验方法对尿潜血阳性的准确度分析[J].现代诊断与治疗，2013(8)：1847-1848.
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