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分析黏液型铜绿假单胞菌对抗生素的耐药性
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摘 要：目的 探讨黏液型铜绿假单胞菌(PA)的耐药性和耐药特征，指导临床合理使用抗菌药物。 方法采用湖南天地人微生物分析系统对辽阳市二院2009年1月～2012年12月临床分离的95株黏液型铜绿假单胞菌耐药情况进行数据分析。 结果 黏液型铜绿假单胞菌对美洛培南100.0%敏感，其余抗菌药物的耐药率为2.1%～35.8%;2009年～2012年黏液型铜绿假单胞菌对除美洛培南以外的其他抗生素耐药性有上升趋势。 结论 黏液型铜绿假单胞菌对抗生素体外药敏试验耐药性较低，但由于产生生物膜，体内呈耐药现象。临床治疗选药时必须考虑黏液型铜绿假单胞菌在体内存在生物膜的影响因素，应加强监测，指导临床合理使用抗生素并控制医院耐药菌感染的流行。
关键词：黏液型铜绿假单胞菌;耐药性;生物膜;抗菌药物
铜绿假单胞菌广泛分布于各种水、空气，及正常人的皮肤、肠道和呼吸道等处，是土壤中最常见细菌之一，也是临床上常见的条件致病菌，可引起人体多部位感染。因其易定植、易变异以及多重耐药性的特征，已成为医院感染的重要病原菌之一。全国革兰阴性菌耐药监测(NPRS)数据显示，近年来铜绿假单胞菌在所有院内感染的革兰阴性菌中位居前列[1]。本文对本院分离出的95株黏液型铜绿假单胞菌进行耐药性分析，以指导临床合理使用抗生素。
1 资料与方法
1.1 一般资料
菌株来源于2009年1月～2012年12月辽阳市第二人民医院临床分离的95株黏液型铜绿假单胞菌(排除同一患者相同部位重复分离到的相同细菌)，以铜绿假单胞菌ATCC27853为药敏实验质控菌株(购自中国药品生物制品检定所)。
1.2 仪器与试剂
哥伦比亚血琼脂培养基(贝瑞特生物技术(郑州)有限公司生产，批号：0011219)，伊红美兰培养基(自制)，伊红美兰琼脂(杭州天和微生物试剂有限公司生产，生产批号：120531)，湖南天地人微生物分析系统TRB-200B(湖南长沙天地人生物科技有限公司生产)，湖南天地人非发酵菌科生化药敏试验卡(湖南天地人生物科技有限公司生产，批号：2012829)。
1.3 方法
严格按照《全国临床检验操作规程》将送检标本接种在血培养基和伊红亚甲蓝培养基，取血培养基上生长良好的可疑菌落进行分离培养，取纯培养菌落配制0.5麦氏单位细菌悬液，用湖南天地人微生物分析系统非发酵菌科细菌药敏鉴定板进行鉴定，经鉴定为铜绿假单胞菌，药敏结果均通过专家分析系统。抗生素的耐药率的计算方法：抗生素的耐药率 =(抗生素中介的菌株数 + 抗生素耐药的菌株数)/抗生素药敏实验菌株数×100%。
2 结果
药敏结果提示，2009～2012年16种抗生素对铜绿假单胞菌的总耐药率分别为：哌拉西林35.8%、氨曲南32.6%、头孢唑啉28.4%、头孢曲松27.4%、庆大霉素26.3%、妥布霉素17.9%、复方新诺明15.8%、哌拉西林/他唑巴坦11.6%、黏菌素10.5%、环丙沙星8.4%、氧氟沙星7.4%、左氧氟沙星6.3%、头孢他啶5.3%、头孢吡肟4.2%、阿米卡星2.1%、美洛培南0.0%;2009～2012年每年分离的黏液型铜绿假单胞菌分别为：16、23、26、30株，呈逐年上升趋势;95株黏液型铜绿假单胞菌的药敏结果提示，黏液型铜绿假单胞菌对美洛培南100.0%敏感，其余抗菌药物的耐药率为2.1%～35.8%;2009～2012年黏液型铜绿假单胞菌对16种抗生素的耐药率结果提示，黏液型铜绿假单胞菌对除美洛培南以外的其他抗生素的耐药性有上升趋势(表1)。
3 讨论
铜绿假单胞菌在自然界中广泛存在，能引起人体多脏器、多部位的严重感染，是临床常见的条件致病菌[2]，主要导致呼吸道、泌尿道和血液感染[3]。本文结果提示，黏液型铜绿假单胞菌对美洛培南敏感，其余抗菌药物的耐药率为：阿米卡星 < 头孢吡肟 < 头孢他啶 < 左氧氟沙星 < 氧氟沙星 < 环丙沙星 < 黏菌素 < 哌拉西林/他唑巴坦 < 复方新诺明 < 妥布霉素 < 庆大霉素 < 头孢曲松 < 头孢唑啉 < 氨曲南 < 哌拉西林。2009～2012年黏液型铜绿假单胞菌对除美洛培南以外的其他抗生素耐药性有逐年上升的趋势。黏液型铜绿假单胞菌虽然体外药敏试验敏感，但临床体内用药大多无效，主要是因为其细菌表面产生大量黏液，而形成生物膜[4]。铜绿假单胞菌是常见的形成生物膜的菌类之一，形成生物膜后，由于其渗透限制作用，导致细菌耐药性增强，难以清除[5]。临床用奎诺酮类药物与敏感的其他抗菌素联合用药，奎诺酮类药物能破坏黏液型铜绿假单胞菌的生物膜[6]，使抗生素进入到菌体内部，从而达到杀灭致病菌的效果。近年来，泛耐药铜绿假单胞菌的产生使临床对铜绿假单胞菌的治疗面临新的问题[7]，本文临床分离的95株黏液型铜绿假单胞菌中未发现泛耐药菌株。铜绿假单胞菌对抗菌药物的高耐药性仍是我国临床医学面临的严峻问题[8]，黏液型铜绿假单胞菌被膜的产生有多方面的原因，大量抗菌药物的应用及内置管道等都易诱发生物膜的产生，临床应加强加大抗菌药物的监管和应用，减少黏液型铜绿假单胞菌引起的院内感染，监测抗菌药物对黏液型铜绿假单胞菌的耐药性变化，及时为临床提供抗菌药物的耐药性变化，指导临床用药。
参考文献：
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[3] Biedenbach DJ，Moet GJ，Jones RN. Occur rence and antimir crobial resistance pattern comparisons among bloods tream irrfection isolates from the sentry antimicrobial surveillance program(1997-2002)[J]. Diagn Microbiol Infect Dis，2004，50(1)：59-69.
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